时隔3年后，韩苍发布最新科研成果论文

时隔3年，曾所处大媒体湍流的韩风雪公开了一项年末所成果成果。近日，韩风雪在先为刊印网站BioRxiv上出版了一篇关于基因编辑的新评论：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。评论共有5名原作者，依次为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，岗位单位之外为河北高科技该大学基因编辑成果中所心。其中所，韩风雪为通讯原作者。据明了，专著中所提到的CasE是Ⅰ-E改型 CRISPR蛋白的核子心成分，它通过相结合特定的茎环地带直接处理pre-crRNA，所亦称 CasE Binding S，简所称为CBS。CasE保守His20参与催化已逝性，ΔHis26-TtCse3突变的CasE（dCasE）则失去了催化已逝性，但仍然与其核酸联结。在该成果中所，通过将 split 红光与dCasE的N端和C-末端（ΔHis20）融合，框架了已逝体RNA物件VN-dCasE-VC。该子系统仅在存在靶RNA时才发出红光，从而增强数据压缩。在已逝肝细胞中所展开GIS的RNA，不须要特定的亚肝细胞分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T肝细胞中所的高水平暗示和之外匀分布表明CasE和dCasE适合于已逝肝细胞中所的RNA可用。为了测试者CasE在灵长目肝细胞中所暗示时是否具有强已逝性，原作者框架了“关闭”报告基因质粒CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中所的GFP mRNA和CasE相结合基因座（CBS）组成。当CasE被导入子系统时，GFP暗示水平急剧下降。同时，为了进一步测试者CasE已逝性，原作者还框架了“开启”报告基因质粒RED-16×CBS-Lin28-C1，其中所CBS放入RED小分子基因的3′-UTR区和Lin28的上游。Lin28是RNA核子保留频率，在其3′-UTR中所具有lin28频率的RED小分子mRNA近乎不能转译成氨基酸。CBS-CasE依靠一般来说切断lin28频率并从核子被囚靶mRNA主要用途转译（图1E和图1F）。这些表明CasE可以相结合并切出灵长目肝细胞中所的CBS。另外，为了将dCasE-CBS电磁场设计到RNA子系统中所，原作者通过将split-FP5-7与dCasE亚基相结合。发现一个发行版，即VN-dCasE-VC能够发出红光，这可能是由于不正确的折叠或稳定状态，但是当与靶RNA（CBS）相结合时，可以在红光成像下清楚地捕获红光频率，即使VN-dCasE-VC暗示质粒的转染更高剂量非常更高。每一次，原作者使用VN-dCasE-VC子系统灵长目肝细胞中所过暗示的β-肌动亚基（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC子系统在肝细胞质中所辨识出强红光。此外还观察到，向靶mRNA掺入愈来愈多CBS可缓解频率，红光愈来愈清晰，因此，可以通过增加CBS的总数来探测更高重元素的mRNA。总的来说，韩风雪开发团队发明了一种取而代之RNA物件，将其命名为VN-dCasE-VC，该子系统能够已逝肝细胞中所不能背景的特定RNA，通过红光将其GIS。目前已是两种已逝肝细胞RNA扫描物件，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雪开发团队共同开发的dCasE子系统，扫描真实感由于MS2，而且，dCasE亚基的分子量为22kDa，更远大于Cas13a的130kDa，dCasE的小分子量愈来愈容易递送至肝细胞内，因此愈来愈适合主要用途已逝肝细胞的RNA。一位比起韩风雪的民众透露：“这篇评论是此前韩风雪岗位的延续，用以都是共同开发基因编辑物件。”不过，值得注意的是，该成果目前出版于先为刊印网站，尚未经过同行审定，对此，有科研民众指出，首发在未经同行审定的先为刊印上，是为了获得首发有权。“韩风雪下一步还会季末正式学术刊物的。”前述民众推测。不知道此次取而代之成果成果是否会再次给韩风雪带来关注，2016年5年末，《自然—生物核子心技术》出版韩风雪开发团队取而代之基因编辑核子心技术NgAgo，被平面媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的童话故事原改型揣测而走红，直至半年，韩风雪个人及其所在该大学陆续获得各类名誉教授和大量费用资助，但亦有国内多名基因编辑领域科学家账号发声所称物理结果容易重复，怀疑物理结果的真实性。2017年8年末，《自然—生物核子心技术》出版题为《是该数据好像的时候了》社评，同月撤走韩风雪开发团队于2016年5年末2日出版在该学术刊物的专著。2018年9年末，河北高科技该大学公告，韩风雪开发团队不存在客观造假。但依据有关原则上，取消韩风雪所获得的荣誉所称号，暂停韩风雪开发团队顾及的科研项目并交回科研费用。韩风雪开发团队发言所称，物理设计存在瑕疵、成果过程存在着不有条理的问题。有业界民众表示：“这波后来，NgAgo这个成果顺时针在中所华人民共和国做得缓慢。韩风雪他们的岗位开展起来也来得困难，连教师也不能新招。”